دستگاه HPLC

 

دستگاه HPLC به این صورت عمل می کند که عناصر مخلوطی که به شکل مایع و یا گاز هستند، از لوله مخصوص عبور می کند و با توجه به سرعتی که از لوله عبور می کنند، اجزای تشکیل دهنده آن تجزیه خواهد شد.

 

کروماتوگرافی در واقع از دو فاز تشکیل شده است که به شکل ثابت و متحرک هستند، فاز متحرک مربوط به ماده ای است که باید تجزیه شود و فاز ثابت مربوط به بخش جداسازی می شود.

 

روش جداسازی کار آمد با دستگاه HPLC

 

HPLC نام دستگاهی است که مخفف کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (High-Performance Liquid Chromatography) می باشد و با استفاده از آن می توان به صورت کاملا دقیق به جداسازی و اندازه گیری مواد پرداخت.

 

تاریخچه کروماتوگرافی به جداسازی ماده سبز برگ ها از آنها بر می گردد. ماده ای که به شکل مخلوط است از فاز متحرک عبور می کند. در دستگاه HPLC با اصطلاحاتی مانند  فاز متحرک که به گاز و یا مایعی گفته می شود که در  دستگاه کروماتوگرافی جریان دارد و نمونه را در ستون جابجا می کند.

 

فاز ساکن دستگاه HPLC جامد و یا مایع است که ماده مورد نظر برای جداسازی بر روی این فاز جذب و از هم جدا می شوند. نمونه مورد نظر نیز معمولا مایع است که دستگاه HPLC تزریق می شود.

 

این دستگاه در آزمایشگاه های شیمی بویژه شیمی تجزیه بسیار پر کاربرد است و در گرایش های دیگر شیمی نیز بسیار مورد توجه می باشد. در اکثر آزمایشگاه ها بویژه واکنش های پیچیده که از مواد اولیه تخصص استفاده می شود برای تعیین خلوص ماده بکار رفته در ابتدا تجزیه ای از ماده صورت می گیرد تا از خلوص ماده مطمئن شود.

 

پایه و اساس کار دستگاه HPLC به تمایل فاز متحرک به فاز ثابت است به این صورت که ماده ای که تمایل به فاز ثابت دارد سرعت حرکتش از ستون کروماتوگرافی بسیار پایین است و اگر تمایل به فاز متحرک داشته باشد به سرعت از ستون عبورمی کند.

 

با قسمت های مختلف دستگاه HPLC آشنا شوید!

 

با قسمت های مختلف دستگاه HPLC آشنا شوید!

 

دستگاه HPLC از قسمت های تشکیل شده است که بر اساس آن ماده مورد نظر با ورود به  دستگاه طی مراحلی به صورت کامل جداسازی می شود. یکی از بخش های موجود در دستگاه مخزن های حلال است که محل قرار گیری فاز متحرک می باشد.

 

پمپ برای به حرکت در آوردن مواد:

 

از بخش های مهم دیگر، موتور و پمپ در این دستگاه است. علت وجود موتور  ایجاد فشار در بخش ستون های کروماتوگرافی است. در واقع برای اینکه حلال جریان داشته باشد و مواد را با خود حمل کند نیاز به فشاری است که توسط پمپ ایجاد می شود.

 

از ویژگی های پمپ موجود در دستگاه HPLC می توان به تولید فشار ثابت در این دستگاه اشاره نمود با توجه به نوع ماده ای که در دستگاه نیاز به جداسازی دارد جریان حلال را با کمک دستگاه تنظیمی می کنیم. پمپ و یا موتور موجود در دستگاه حلال را از مخزن می گیرد و با یک فشار و جریان ثابتی به دستگاه وارد می کند و دمای دستگاه با محیط نیز یکسان است.

 

پمپ هایی که در دستگاه HPLC استفاده می شود شامل پمپ های پیستونی، جابه جایی یا سرنگی، پمپ های فشار ثابت می شود که می تواند فشاری با قدرت ۶۰۰ پاسکال را ایجاد نماید و سرعت جریانی ۱/۰ تا ۱۰ دقیقه در میلی متر می باشد. به راحتی می توان با این پمپ جریان ورودی را کنترل نمود و از جنس فولاد ضد زنگ ساخته شده است  که آن را در برابر خوردگی مقاوم می کند.

 

سرنگ برای تزریق نمونه به دستگاه HPLC:

 

سرنگ ها دارای حجم های مختلفی هستند و مقداری که به ستون تزریق می شود ۳۰ میکرومتر است. با استفاده از سرنگ نمونه را قبل از اینکه به ستون کروماتوگرافی وارد کنند به قسمت محافظ ستون وارد می کنند که جنس آن از جنس ستون است و ضخامت یک  سانتی متری دارد.

 

انجام این مرحله برای چک کردن ماده تزریقی است که در صورت وجود ناخالصی و یا واکنش با ستون احتیاط های لازم برای انجام کار با این ماده در نظر گرفته می شود.

 

ستون های کروماتوگرافی چه ویژگی هایی دارند؟

 

ستون های کروماتوگرافی چه ویژگی هایی دارند؟

 

ستون موجود در دستگاه HPLC طولی معادل ۱۰ تا ۳۰ سانتی متر دارد. بیشترین جنسی که این ستون ها دارد آکتا دسیل سیلان است. بعد از اینکه جداسازی مواد توسط ستون انجام شد باید آن را با محلول شستشو شست.

 

آکتا دسیل سیلان غیر قطبی است و باید فاز متحرکی که برای آن ستون استفاده می شود قطبی باشد در واقع همیشه فاز متحرک و ماده پر کننده از نظر قطبی بودن خلاف یکدیگر می باشند.

 

آب و متانول یکی از مواد شستشو دهنده ستون می باشد. سیستم دستگاه HPLC با دو نام شناخته می شود فاز نرمال و یا فاز معکوس که با توجه به فاز متحرک و ثابت دستگاه نامگذاری می شود، که در صورت مخالف بودن نام نرمال می گیرد و اگر با هم مشابهت داشته باشند فاز معکوس نامیده می شود.

 

ستون ها از جنس ضد زنگ هستند. به صورت کلی ستون ها در سه دسته تقسیم می شوند : ستون کروماتوگرافی مایع، ستون محافظ و ستون تجزیه ای.

 

انواع پر کننده ستون کروماتوگرافی کدام اند؟

 

دو نوع از پر کننده وجود دارد یک نوع به نام ذرات پوسته دار است که لایه ای نا متخلخل از جنس سیلیس، آلومین و یا یک رزین تبادل یونی روی بخش نامتخلخل پخش شده است. این نوع پر کننده ها برای ستون های محافظ استفاده می شود.

 

نوع دیگری از پرکننده ها از نوع متخلخل می باشد. ذرات سیلیسی که در این ستون استفاده می شود از تجمع ذرات ریزمیکرون ساخته می شود و در شرایطی تولید می شوند که به ذرات بزرگتر یکنواختی تبدیل می شود.

 

آشکار ساز ها  بخش مهم دیگری از دستگاه هستند که دارای انواع مختلف با عملکرد های متفاوت می باشد و در کل موجب نشان دادن فاز متحرکی هستند که از ستون ثابت خارج می شود.

 

 

برای جستجوی این محصول اینجا جستجو کنید.

خرید محصولات از این سایت تحت گارانتی دکتر شاهرضایی می باشد.